Doel Het beoordelen van de diagnostische testnauwkeurigheid van twee snelle antigeentests in asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten van mensen met SARS-CoV-2-infectie op dag 5 na blootstelling.
Opzet Prospectief dwarsdoorsnedeonderzoek.
Setting Vier GGD covid-19 testlocaties in Nederland.
Deelnemers van 4274 waren achtereenvolgens nauwe contacten (geïdentificeerd via test-en-trace-programma of app voor het traceren van contacten) van 16 jaar of ouder en asymptomatisch voor covid-19 bij het aanvragen van een test.
Belangrijkste uitkomstmaten Gevoeligheid, specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden van Veritor System (Beckton Dickinson) en Biosensor (Roche Diagnostics) snelle antigeentesten, met reverse-transcriptase polymerasekettingreactie (RT-PCR) testen als referentiestandaard. De grens van de virale belasting waarboven 95% van de mensen met een positief RT-PCR-testresultaat viruskweekpositief was, werd gebruikt als een proxy voor besmettelijkheid.
Resultaten Van de 2678 deelnemers die met Veritor werden getest, hadden 233 (8,7%) een RT-PCR-bevestigde SARS-CoV-2-infectie, van wie 149 ook werden gedetecteerd door de snelle antigeentest (gevoeligheid 63,9%, 95% betrouwbaarheidsinterval 57,4% tot 70,1% ). Van de 1596 deelnemers die met Biosensor werden getest, hadden 132 (8,3%) een RT-PCR-bevestigde SARS-CoV-2-infectie, van wie 83 werden gedetecteerd door de snelle antigeentest (gevoeligheid 62,9%, 54,0% tot 71,1%). Bij degenen die op het moment van monstername nog steeds asymptomatisch waren, was de gevoeligheid 58,7% (51,1% tot 66,0%) voor Veritor (n=2317) en 59,4% (49,2% tot 69,1%) voor Biosensor (n=1414), en in degenen die symptomen ontwikkelden waren 84,2% (68,7% tot 94,0%; n=219) voor Veritor en 73,3% (54,1% tot 87,7%; n=158) voor Biosensor. Wanneer een viral load cut-off werd toegepast voor infectie (≥5,2 log10 SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml), was de algehele gevoeligheid 90,1% (84,2% tot 94,4%) voor Veritor en 86,8% (78,1% tot 93,0). %) voor Biosensor en 88,1% (80,5% tot 93,5%) voor Veritor en 85,1% (74,3% tot 92,6%) voor Biosensor, onder degenen die de hele tijd asymptomatisch bleven. De specificiteiten waren >99%, en positieve en negatief voorspellende waarden waren >90% en >95%, voor beide snelle antigeentesten in alle analyses.
Conclusies De gevoeligheden van zowel snelle antigeentests bij asymptomatische als presymptomatische nauwe contacten die op dag 5 werden getest na nauw contact met een indexgeval waren meer dan 60%, oplopend tot meer dan 85% nadat een viral load cut-off als proxy was toegepast voor besmettelijkheid.
De hoeksteen van de controle tijdens de covid-19-pandemie was de implementatie van generieke infectiebeheersingsmaatregelen (handhygiëne, fysieke afstand nemen en thuisblijven wanneer de symptomen zich ontwikkelen) in combinatie met test-en-traceprogramma's. Wiskundige modelstudies hebben aangetoond dat test-and-trace-programma's in combinatie met generieke maatregelen voor infectiebeheersing met succes SARS-CoV-2-epidemieën kunnen beheersen, zelfs als wordt aangenomen dat ten minste 40% van de overdrachten het gevolg kan zijn van asymptomatische mensen of mensen van wie de symptomen nog niet ontwikkeld.12 Dergelijke maatregelen kunnen het voortplantingsgetal echter alleen terugbrengen tot onder 1,0, wanneer vertragingen in test en trace tot een minimum worden beperkt.34 In test-and-trace-programma's worden contacten van besmette personen actief opgespoord en wordt testen aangeboden, in eerste instantie alleen wanneer symptomen ontwikkelen zich, maar in toenemende mate ook wanneer asymptomatisch of voordat symptomen zich ontwikkelen
In de eerste fase van de pandemie hadden alleen mensen met symptomen toegang tot (gratis) tests op testlocaties van de Nederlandse GGD en werd er getest met behulp van reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) van gecombineerde orale en neus- of nasofaryngeale uitstrijkjes. De gevoeligheden van deze tests nemen toe naarmate de virale belasting van de bovenste luchtwegen toeneemt, waarvan bekend is dat deze op dag 5 na infectie een hoog plateau bereikt.6789 Vanaf 1 december 2020 was het mogelijk om op dag 5 asymptomatische nauwe contacten van indexgevallen te testen na blootstelling.
Hoewel RT-PCR wordt beschouwd als de referentietest voor SARS-CoV-2, heeft het ook nadelen. RT-PCR-testplatforms zijn doorgaans alleen beschikbaar in gecentraliseerde laboratoria en vereisen batchverwerking van monsters, waardoor vertragingen bij het testen ontstaan. Point-of-care SARS-CoV-2-tests kwamen al snel beschikbaar en hiervan zijn snelle laterale-flow-antigeen-diagnostische tests veelbelovend.10 Deze tests vereisen geen of minimale apparatuur, leveren binnen enkele minuten een resultaat op en kunnen in een reeks worden uitgevoerd instellingen met relatief weinig training.
Inmiddels hebben meerdere onderzoeken snelle antigeentesten vergeleken met RT-PCR-testen.11 Op basis van deze onderzoeken concludeerde het Ministerie van Volksgezondheid eind 2020 dat het uitvoeren van snelle antigeentesten voldoende was om te worden gebruikt in de GGD-test plaatsen bij patiënten met milde tot matige symptomen zonder de noodzaak van hertesten met RT-PCR.12 Het ministerie adviseerde om RT-PCR-tests voort te zetten bij mensen met ernstige symptomen, medische risicogroepen, mensen die werken in risicovolle omgevingen zoals ziekenhuizen, en asymptomatische of presymptomatische nauwe contacten.13 De reden hiervoor is dat de diagnostische nauwkeurigheid van snelle antigeentests naar verwachting lager zou zijn bij asymptomatische mensen en in monsters met een lagere SARS-CoV-2-virale last.1114 Dit is niet noodzakelijk problematisch als een lagere virale last zich vertaalt in lagere latere verwachte besmettelijkheid.15 Een recent gepubliceerde Cochrane-review toonde aan dat 12 evaluaties van snelle antigeentests bij asymptomatische mensen waren uitgevoerd ed tot 30 september 2020, waarvan er slechts vier rekening hielden met blootstelling aan een indexgeval.16 De geïdentificeerde onderzoeken waren klein en voerden geen viruskweek uit. Evaluaties die sinds 1 oktober 2020 zijn gepubliceerd, hadden dezelfde beperkingen.11171819 In de huidige studie hebben we de nauwkeurigheid gekwantificeerd van twee snelle antigeentests voor het detecteren van SARS-CoV-2-infectie met RT-PCR-tests als referentiestandaard in asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten van index gevallen.
Deze prospectieve cross-sectionele diagnostische testnauwkeurigheidsstudie was ingebed in de Nederlandse routinetestinfrastructuur. In Nederland kunnen asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten worden geïdentificeerd door ofwel het test-en-traceprogramma van de Nederlandse volksgezondheidsdienst, de Nederlandse applicatie voor het traceren van mobiele telefoons (de CoronaMelder-app), een persoon met bevestigde SARS-CoV-2-infectie ( index case), of een combinatie hiervan. In het Nederlandse testbeleid werd tussen 1 december 2020 en het einde van de onderzoeksperiode bepaald dat asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten een RT-PCR-test moesten plannen vanaf de vijfde dag na de laatste blootstelling. Aangezien individuen over het algemeen niet worden getest op de dag van hun testverzoek, kunnen sommigen symptomen ontwikkelen op het moment van monstername. Nauwe contacten die op het moment van monstername nog asymptomatisch waren en ≥5 dagen na blootstelling een negatief RT-PCR-testresultaat hadden, werden aangemoedigd om opnieuw getest te worden als ze symptomen ontwikkelden en om nauw contact met kwetsbare mensen te vermijden.20
De deelnemers werden achtereenvolgens geworven op vier Nederlandse GGD-testlocaties, gelegen in de regio West-Brabant (Raamsdonksveer en Roosendaal) en in de stad Rotterdam (Rotterdam Ahoy en Rotterdam The Hague Airport; reizigers werden uitgesloten). Nauwe contacten die op deze testlocaties aanwezig waren, kwamen in aanmerking als ze 16 jaar of ouder waren, ≥5 dagen na blootstelling gepland waren voor een test, asymptomatisch waren op het moment van de testaanvraag, en bereid en in staat waren om een geïnformeerde toestemming te ondertekenen in Nederlands.
De deelnemers kwamen met de auto (West-Brabant) of te voet (Rotterdam) naar de testlocaties. Het personeel van de testlocatie heeft mondeling de geschiktheid van het onderzoek geverifieerd. In aanmerking komende personen ontvingen een studiefolder en een informatiebrief voor de deelnemers. Na ondertekening van het geïnformeerde toestemmingsformulier werd een korte vragenlijst over aanwezigheid, type en begin van symptomen (zie aanvullend materiaal 1) zelf ingevuld door deelnemers (West-Brabant) of door testlocatiepersoneel (Rotterdam) terwijl deelnemers wachtten op de monstername. Twee mensen hebben onafhankelijk van elkaar vragenlijstgegevens in tweevoud geëxtraheerd.
Aanvullend materiaal 2 geeft een gedetailleerde beschrijving van hoe de specimens werden verzameld en getest, inclusief het kweken. Een getrainde medewerker nam twee gecombineerde orofaryngeale (West-Brabant) of oronasopharyngeale (Rotterdam) swabs van de onderzoeksdeelnemer: één voor RT-PCR-testen en de andere voor snelle antigeentests. De uitstrijkjes werden respectievelijk naar relevante offsite- en onsite-laboratoria getransporteerd.
Tijdens de onderzoeksperiode gebruikten alle onderzoekslocaties Roche cobas 6800/8800-platforms voor RT-PCR-tests (aanvullend materiaal 2). De locaties in West-Brabant gebruikten het BD Veritor Systeem (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ) en de Rotterdamse locaties de Biosensor test (Roche Diagnostics, Basel, Zwitserland). Beide tests zijn uitgevoerd volgens de instructies van de fabrikant. De resultaten van Veritor zijn visueel bepaald in plaats van met een Veritor Plus Analyzer. Interpretatie van de resultaten van de snelle antigeentest werd altijd gedaan vóór het RT-PCR-resultaat (waardoor het personeel geblindeerd was). Evenzo waren de resultaten van de snelle antigeentests niet beschikbaar voor degenen die de RT-PCR-resultaten beoordeelden. Deelnemers ontvingen het resultaat van de RT-PCR-test, maar niet het resultaat van de snelle antigeentest, om de verdere behandeling te sturen (zoals quarantaineadvies).
In het diagnostisch laboratorium Viroscience van het Erasmus Medisch Centrum zijn zeven dagen lang monsters gekweekt van deelnemers in Rotterdam met een positieve RT-PCR-testuitslag. Zodra cytopathische effecten zichtbaar waren, werd de aanwezigheid van SARS-CoV-2 bevestigd met immunofluorescentiedetectie van SARS-CoV-2 nucleocapside-eiwit (polyklonaal konijnenantilichaam; Sino Biological, Eschborn, Duitsland; aanvullend materiaal 2). Monsters van deelnemers in West-Brabant zijn niet gekweekt.
De primaire uitkomstmaat was de diagnostische nauwkeurigheid (gevoeligheid, specificiteit en positieve en negatieve voorspellende waarden met bijbehorende 95% betrouwbaarheidsintervallen) van elke snelle antigeentest, met RT-PCR als referentiestandaard. De Roche cobas-platforms voor RT-PCR-testen werden gebruikt volgens de instructies van de fabrikant; versterkingscurves en cyclusdrempelwaarden werden geïnterpreteerd met behulp van de interpretatie-algoritmen van de fabrikant, die voldeden aan de Europese richtlijn voor in-vitro diagnostische apparaten. Omdat het aantal individuen zonder RT-PCR of snelle antigeentestresultaten laag was (n=21 (0,5%); fig. 1), hebben we een volledige casusanalyse uitgevoerd.
Stroom van studiedeelnemers. RT-PCR = reverse transcriptase polymerase kettingreactie
Secundaire uitkomsten waren de diagnostische nauwkeurigheidsvariabelen gestratificeerd voor de aanwezigheid van covid-19-achtige symptomen tussen het testverzoek en het tijdstip van bemonstering (ja of nee), het aantal dagen tussen het laatste contact en de datum van bemonstering (<5, 5 en >5 dagen), en verschillende grenswaarden voor virale lading en grenswaarden voor virale lading waarboven 95% van de mensen met een positief RT-PCR-testresultaat een positieve kweek had als indicatie voor besmettelijkheid. Cyclusdrempelwaarden werden eerst omgezet in viral load (SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml) met behulp van een standaardcurve (aanvullend materiaal 2). De grens voor besmettelijkheid werd gedefinieerd als de viral load waarboven 95% van de mensen met een RT-PCR-testuitslag in vitro infectiviteit vertoonde in celkweek.
Ten slotte, om eventuele gemiste infecties vast te leggen op de RT-PCR-test van dag 5, hebben we vooraf het gebruik gespecificeerd van de SARS-CoV-2-testresultatendatabases van deelnemende openbare gezondheidsdiensten om via gepseudonimiseerde koppeling te bepalen of studiedeelnemers met een negatieve dag 5 RT- Het resultaat van de PCR-test was in de daaropvolgende 10 dagen positief getest met een RT-PCR-test of een snelle antigeentest.
Eerdere prestatiestudies van snelle antigeentests bij mensen met covid-19-symptomen vonden gevoeligheden van ongeveer 85%.11152122 We hebben onze steekproefomvangberekening gebaseerd op een verwachte gevoeligheid van 80%, met een foutmarge van 7%, type I-fout van 5 % en een vermogen van 90%. We streefden daarom naar 140 positieve RT-PCR-testresultaten voor elke snelle antigeentest in vergelijking met RT-PCR-test. In onze doelpopulatie verwachtten we een SARS-CoV-2-prevalentie (gebaseerd op RT-PCR-tests) van 10%, en volgden we de positiviteit van de RT-PCR-test in de loop van de tijd nauwlettend om de rekrutering indien nodig te verlengen.
Patiënten en het publiek waren indirect betrokken bij dit onderzoek. Via nieuwsuitzendingen en sociale media zijn sterke signalen en verzoeken van het publiek gedaan om te bepalen of snelle antigeentests, die sneller een testresultaat opleveren dan RT-PCR-tests, ook kunnen worden gebruikt om nauwe contacten te testen van personen die al besmet zijn met SARS-CoV -2 op dag 5 sinds het contact met de indexcase. Omdat de pandemie in Nederland op zijn hoogtepunt was, de urgentie van het onderzoek en de korte tijd van conceptie tot uitvoering van het onderzoek, hebben we niet actief contact gezocht met personen buiten onze grote, multidisciplinaire onderzoeksgroep.
Tussen 14 december 2020 en 6 februari 2021 kwamen 5190 mensen in aanmerking voor deelname, van wie 4295 deelnamen (fig 1). Resultaten voor zowel RT-PCR- als snelle antigeentests waren beschikbaar voor 2678 (99,5%) in de Veritor-groep en 1596 (99,6%) in de Biosensor-groep. De groepen Veritor en Biosensor waren vergelijkbaar: de gemiddelde leeftijden waren respectievelijk 45,9 (SD 17,6) jaar en 40,7 (SD 16,4) jaar, 1370 (51,3%) en 751 (47,3%) waren vrouwelijke deelnemers, en 219 (8,6%) en 158 (10,1%) hadden symptomen ontwikkeld op het moment van monstername (aanvullende tabel S1).
In de Veritor-groep hadden 233 (8,7%) deelnemers een door RT-PCR bevestigde SARS-CoV-2-infectie; hiervan werden er 149 ook gedetecteerd door Veritor, wat resulteerde in een algehele gevoeligheid van 63,9% (95% betrouwbaarheidsinterval 57,4% tot 70,1%; tabel 1). Specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden waren respectievelijk 99,6% (99,3% tot 99,8%), 94,3% (89,5% tot 97,4%) en 96,7% (95,9% tot 97,3%). In de Biosensor-groep hadden 132 (8,3%) deelnemers een door RT-PCR bevestigde SARS-CoV-2-infectie; hiervan werden er 83 ook gedetecteerd door Biosensor, wat resulteerde in een algehele gevoeligheid van 62,9% (54,0% tot 71,1%). Specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden waren respectievelijk 99,5% (98,9% tot 99,8%), 91,2% (83,4% tot 96,1%) en 96,7% (95,7% tot 97,6%).
Diagnostische nauwkeurigheidsvariabelen van twee snelle antigeentests. Waarden zijn percentages (95% betrouwbaarheidsinterval) tenzij anders vermeld
Bij deelnemers die symptomen ontwikkelden tussen het testverzoek en het tijdstip van bemonstering, was de gevoeligheid 84,2% (68,7% tot 94,0%) voor Veritor (n=219; prevalentie 17,4%) en 73,3% (54,1% tot 87,7%) voor Biosensor (n =158, prevalentie 19,0%). Specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden waren 99,4% (97,0% tot 100%), 97,0% (84,2% tot 99,9%) en 96,8% (93,1% tot 98,8%) voor Veritor, en 98,4% (94,5% tot 99,8%), 91,7% (73,0% tot 99,0%) en 94,0% (88,6% tot 97,4%) voor respectievelijk Biosensor.
Bij deelnemers die asymptomatisch bleven tot het moment van bemonstering, was de gevoeligheid 58,7% (51,1% tot 66,0%) voor Veritor (n=2317; prevalentie 7,7%) en 59,4% (49,2% tot 69,1%) voor Biosensor (n=1414 prevalentie 7,1%. Specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden waren 99,6% (99,3% tot 99,8%), 92,9% (86,5% tot 96,9%) en 96,6% (95,8% tot 97,4%) voor Veritor, en 99,5% (99,0% tot 99,8%), 90,9% (81,3% tot 96,6%) en 97,0% (95,9% tot 97,8%) voor respectievelijk Biosensor.
Tabel 1 toont de resultaten van aanvullende secundaire analyses. Aanvullende tabellen S2 en S3 tonen de resultaten voor 2×2 tabellen van alle primaire en secundaire analyses.
Figuur 2 toont de verdeling van virale ladingen bij deelnemers met een positief RT-PCR-testresultaat, gestratificeerd naar een combinatie van het Biosensor-testresultaat en het vermogen om SARS-CoV-2 te kweken. Wanneer de virale belasting ≥5,2 log10 SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml was, konden de monsters van 95% van de deelnemers met positieve RT-PCR-testresultaten worden gekweekt. Het percentage deelnemers met een viral load ≥5,2 log10 SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml was 5,7% in beide groepen (152/2677 voor Veritor en 91/1596 voor Biosensor), en onder degenen met een positieve RT-PCR testresultaat, 65,2% (152/233) in de Veritor-groep en 68,9% (91/132) in de Biosensor-groep. Met behulp van die grens voor virale belasting als maatstaf voor besmettelijkheid, was de gevoeligheid 90,1% (84,2% tot 94,4%) voor Veritor en 86,8% (78,1% tot 93,0%) voor Biosensor. Specificiteit en positieve en negatieve voorspellende waarden waren 99,2% (98,8% tot 99,5%), 87,3% (81,0% tot 92,0%) en 99,4% (99,0% tot 99,7%) voor Veritor en 99,2% (98,6% tot 99,6 %), respectievelijk 86,8% (78,1% tot 93,0%) en 99,2% (98,6% tot 99,6%) voor Biosensor. Figuur 3 toont variabelen voor diagnostische nauwkeurigheid, gestratificeerd op basis van verschillende grenswaarden voor virale belasting. De gevoeligheid van beide snelle antigeentesten bij de grens van infectieuze virale belasting bij deelnemers zonder symptomen op het moment van monstername was 88,1% (80,5% tot 93,5%) voor Veritor (n=2317; prevalentie 4,7%) en 85,1% (74,3). % tot 92,6%) voor Biosensor (n=1414; prevalentie 4,7%). Specificiteit en positief en negatief voorspellende waarden waren 99,2% (98,8% tot 99,6%), 85,0% (77,0% tot 91,0%) en 99,4% (99,0% tot 99,7%) voor Veritor en 99,3% (98,7% tot 99,7 %), respectievelijk 86,4% (75,7% tot 93,6%) en 99,3% (98,6% tot 99,6%) voor Biosensor. Aanvullend figuur 1 toont de diagnostische nauwkeurigheidsvariabelen voor deze groep bij variërende viral load cut-offs.
Verdeling van virale lasten bij deelnemers met een positief resultaat van de reverse-transcriptase-polymerasekettingreactie (RT-PCR), gestratificeerd naar het resultaat van de snelle antigeentest van Biosensor (negatief of positief) en het vermogen om SARS-CoV-2 te kweken of niet
Diagnostische nauwkeurigheidsvariabelen van beide snelle antigeentests voor verschillende definities van positiviteit van de reverse-transcriptase-polymerasekettingreactie (RT-PCR)-test op basis van afkapwaarden voor virale belasting, waarbij een positief RT-PCR-testresultaat met een virale belasting onder de verlaging van de virale belasting -off-drempel wordt als een negatief resultaat beschouwd. Rood gemarkeerde punten geven een grenswaarde voor virale belasting aan van 5,2 log10 SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml, die werd beschouwd als de grens voor virale belasting voor besmettelijkheid zoals bepaald door de virale cultuur. PPV=positief voorspellende waarde; NPV=negatieve voorspellende waarde
Na koppeling met testresultatendatabases van deelnemende openbare gezondheidsdiensten, bleken slechts 57 (1,6%) deelnemers een positief SARS-CoV-2-testresultaat te hebben binnen 10 dagen na hun negatieve dag 5-testresultaat door RT-PCR. Geen van hen had een positief testresultaat op dag 5 door middel van een snelle antigeentest.
De Veritor en Biosensor laterale flow snelle antigeentesten behoren tot de meest gebruikte diagnostische sneltesten voor SARS-CoV-2 in Nederland, maar zijn alleen geëvalueerd bij mensen met symptomen van covid-19. We bepaalden de prestaties van deze tests in asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten op de vijfde dag na blootstelling aan een indexgeval. Ten tijde van het onderzoek was de prevalentie van SARS-CoV-2 in onze onderzoekspopulatie ongeveer 8,5% en in de Nederlandse testerspopulatie als geheel (mensen met symptomen en asymptomatische of presymptomatische testers gecombineerd) ongeveer 18%.23 Beide tests had een gevoeligheid van ongeveer 63% in vergelijking met RT-PCR-testen. De gevoeligheid nam toe tot 87-90% wanneer een virale load-cut-off van ≥5,2 log10 SARS-CoV-2 E-genkopieën/ml werd gebruikt als een proxy voor besmettelijkheid. Specificiteiten en positief en negatief voorspellende waarden waren hoog in analyses voor beide tests.
De gevoeligheden van de tests waren naar verwachting lager dan die over het algemeen worden gerapporteerd voor mensen met symptomen en hoger dan die voor asymptomatische mensen die willekeurig worden getest.11 Onze onderzoekspopulatie bestond uit deelnemers die asymptomatisch waren op testverzoek en symptomen ontwikkelden tussen testverzoek en daadwerkelijke testen (ongeveer 10%) en degenen die dat niet deden. De gevoeligheden van de snelle antigeentesten waren in de eerste groep bijna 90%, wat vergelijkbaar is met eerdere onderzoeken bij mensen met symptomen.1116 De gevoeligheden waren bij de laatste groep bijna 60%, wat hoger is dan die in eerdere onderzoeken. van asymptomatische mensen.1116 Die onderzoeken waren echter over het algemeen gericht op degenen die willekeurig werden getest en niet omdat ze waren blootgesteld aan een indexgeval (nauwe contacten). Ten tijde van ons onderzoek was de prevalentie van SARS-CoV-2 in de Nederlandse bevolking als geheel ongeveer 2%,17 wat meer dan vier keer lager is dan de prevalentie in onze onderzoekspopulatie van degenen met bekende blootstelling aan indexgevallen .
We gebruikten RT-PCR op Roche cobas-platforms als referentietest. RT-PCR-tests worden beschouwd als de referentietests die de voorkeur hebben,24 maar met één belangrijk voorbehoud: eerdere studies hebben aangetoond dat de gemiddelde virale belasting en de gevoeligheid van de RT-PCR-test geleidelijk toenemen in de 5-7 dagen na infectie, en een plateau bereiken dat duurt 1-2 weken en neemt dan af.7 Tegen de tijd dat mensen symptomen ontwikkelen, hebben ze over het algemeen een voldoende hoge virale belasting om de gevoeligheid van de RT-PCR-test als optimaal te beschouwen. De viral load bij de meeste mensen die (nog) geen symptomen hebben, is echter lager en de gevoeligheid van de RT-PCR-test zou daarom suboptimaal kunnen zijn. Tegelijkertijd zijn veel van deze mensen in staat SARS-CoV-2 door te geven aan anderen. Het Nederlandse ministerie van Volksgezondheid heeft dit delicate evenwicht tussen besmettelijkheid en RT-PCR-testgevoeligheid aangepakt door asymptomatische en presymptomatische nauwe contracten van indexgevallen aan te moedigen om vanaf de vijfde dag na blootstelling aan een indexgeval te worden getest. Onze gegevens suggereren dat dit gepast is, omdat slechts 1,6% van degenen met een negatieve RT-PCR en snelle antigeentest op de vijfde dag na blootstelling een positief testresultaat had binnen de daaropvolgende 10 dagen.
We gebruikten de viral load cut-off waarboven 95% van de mensen met een positief RT-PCR-testresultaat een positieve viruscultuur had als een proxy voor besmettelijkheid. Hoewel deze grenswaarde niet volledig op bewijzen is gebaseerd, is het een beste schatting op basis van de huidige kennis en is het minder willekeurig dan het gebruik van drempelwaarde-grenswaarden voor de RT-PCR-cyclus van 25 of 30, zoals vaak wordt gedaan.2125 Diermodellen hebben dit opgeleverd enig bewijs voor een verband tussen de besmettelijkheid van SARS-CoV-2 en het vermogen om een virus te kweken. In een gouden hamstermodel correleerde bijvoorbeeld besmettelijkheid met de detectie van infectieus virus in kweek, maar niet met detectie van viraal RNA.26 Gegevens uit studies bij mensen zijn beperkt, maar nemen toe. Correlaties tussen infectiviteit in kweek en viral load, en tussen viral load en secundaire aanvalsfrequentie, zijn vastgesteld, maar de variabiliteit tussen laboratoria en onderzoeken was groot.27282930 Verder is de exacte grens voor virale belasting van de bovenste luchtwegen waaronder geen transmissie plaatsvindt is nog niet bekend; sommige rapporten suggereren besmettelijkheid bij een virale lading van slechts 10.000 SARS-CoV-2 RNA-kopieën/ml.31
Het vermogen om het virus te kweken wordt niet alleen beïnvloed door de virale belasting van het monster, maar ook door andere factoren die verband houden met de gastheer, het type virale kweekkits en gebruikte methoden en het ervaringsniveau van het laboratoriumteam. Een belangrijke gastheerfactor is de aanwezigheid van SARS-CoV-2 neutraliserende antilichamen.25 Om de bezorgdheid over de grote variabiliteit tussen laboratoria weg te nemen, hebben we alle viruskweken uitgevoerd in één ervaren laboratorium (in het Erasmus Medisch Centrum Viroscience diagnostisch laboratorium in Rotterdam)152125 op verse materiaal (geen vries-dooi cycli). Daarom zijn alleen specimens van de Rotterdamse onderzoekslocaties gekweekt en is de grens voor besmettelijkheid geëxtrapoleerd naar specimens die zijn verzameld door de West-Brabantse locaties. Geruststellend was dat de twee laboratoria vergelijkbare RT-PCR-testkalibratiecurven hadden, wat aangeeft dat cyclusdrempelwaarden overeenkwamen met vergelijkbare virale belastingen.
Sterke punten van onze studie zijn de goed gedefinieerde onderzoekspopulatie, de grote steekproefomvang, het tegelijkertijd verzamelen van monsters voor de referentie- en indextest, en referentie- en indextests uitgevoerd door getraind personeel dat blind was voor het resultaat van de andere test. We beschouwen het gebruik van viruskweekresultaten in onze definitie van besmettelijkheid ook als een sterkte, ondanks enkele van de beperkingen, omdat RT-PCR-cycluswaarden nog meer worden beïnvloed door de laboratoriumworkflow dan de methoden die we hebben gebruikt.
Ons onderzoek heeft ook beperkingen. Ten eerste hebben we het type van de nauwe contacten (bijvoorbeeld thuis, op het werk, op school of in het openbaar vervoer) of de duur van de nauwe contacten niet beoordeeld. Dit is vooral problematisch bij huishoudelijke contacten, omdat blootstelling over een langere periode kan plaatsvinden, wat gepaard gaat met een grote kans om positief te testen (20% versus 10%).23 In ons onderzoek meldde 12% van de deelnemers dat hun laatste contact was in de afgelopen vijf dagen, en deze groep had een hoger RT-PCR-testpositiviteitspercentage dan de onderzoekspopulatie als geheel. We vermoeden dat het huishoudelijke contacten zijn geweest met langdurige blootstelling, maar dit kan niet worden geverifieerd. Ten tweede volgden we deelnemers die op dag 5 een negatief RT-PCR-testresultaat hadden niet actief op, maar hebben we expliciet per protocol ontworpen om gepseudonimiseerde koppeling van deze deelnemers aan de testresultatendatabases van de deelnemende openbare gezondheidsdiensten toe te passen. De 1,6% van de geïnfecteerde naaste contacten die volgens die database een positief testresultaat hadden binnen 10 dagen na hun negatieve dag 5 RT-PCR-testresultaat in onze studie, vertegenwoordigen waarschijnlijk alleen degenen die symptomen ontwikkelden en om die reden op een bepaald moment om een nieuwe test vroegen. van de deelnemende openbare gezondheidsdiensten. Actieve follow-up, inclusief herhaald testen bij alle studiedeelnemers, zou de onzekerheid rond fout-negatieve RT-PCR-testresultaten volledig hebben verminderd, zoals ook werd aanbevolen in een recent richtsnoer.24 Helaas konden we dit niet implementeren voor ethische en logistieke beperkingen, aangezien ons onderzoek was ingebed in drukke testlocaties van de GGD tijdens het hoogtepunt van de tweede golf in Nederland.
Als resultaat van dit onderzoek hebben Nederlandse testlocaties begin 2021 de twee (en andere landelijk goedgekeurde) snelle antigeentesten geïmplementeerd voor het testen van nauwe contacten, ook als ze (nog) geen symptomen hebben ontwikkeld. Nauwe contacten, ongeacht de symptomen, worden aangemoedigd om zich zo snel mogelijk na bekende blootstelling te laten testen om vertragingen te voorkomen bij het identificeren van mensen die positief zijn voor SARS-CoV-2. Als ze echter vóór de vijfde dag na blootstelling worden getest, worden ze op de vijfde dag opnieuw getest en blijven ze in quarantaine totdat het testresultaat van de vijfde dag negatief is. Snelle antigeentesten worden echter nog steeds niet gebruikt in situaties met een hoog risico, zoals het testen van kwetsbare mensen in zorginstellingen, ernstig zieke patiënten of gezondheidswerkers.
De voordelen van snelle antigeentesten in vergelijking met RT-PCR-testen zijn onder meer een vereenvoudigde logistiek en verminderde afhankelijkheid van apparatuur (die op zijn beurt testen in de gemeenschap en zelftests mogelijk maakt) en minder vertragingen. In hoeverre deze voordelen opwegen tegen de lagere gevoeligheid in vergelijking met RT-PCR-testen is op dit moment niet bekend. Met het toenemende gebruik van snelle antigeentesten in plaats van RT-PCR-testen, verwachten we dat het aantal gemiste infecties zal toenemen. Dit onderstreept het belang van onmiddellijke zelfquarantaine en herhalingstests wanneer symptomen optreden na een negatief resultaat door snelle antigeentest of RT-PCR. Bovendien was valse positiviteit van snelle antigeentestresultaten zeldzaam in onze studie, maar zou een groter probleem kunnen worden naarmate de prevalentie van SARS-CoV-2 afneemt. In dat geval moeten positieve resultaten met snelle antigeentests mogelijk worden bevestigd door RT-PCR.32 We zullen de voor- en nadelen van snelle antigeentests blijven monitoren in vergelijking met RT-PCR-testen met behulp van nationale test-en-tracedatabases en wiskundige modellering.
De gevoeligheden van beide snelle antigeentests vergeleken met RT-PCR-tests bij asymptomatische en presymptomatische nauwe contacten op de vijfde dag na blootstelling aan het indexgeval was meer dan 60%, oplopend tot meer dan 85% nadat een virale load cut-off was toegepast als een proxy van besmettelijkheid. De snelle antigeentesten van Veritor en Biosensor kunnen dus betrouwbaar worden gebruikt om vanaf de vijfde dag na infectie nauwe contacten op besmettelijkheid te testen, ook als ze (nog) geen symptomen hebben ontwikkeld, maar de tests mogen niet worden gebruikt wanneer de gevolgen van gemiste infecties ernstig zijn.
Eind 2020 waren snelle antigeentests geëvalueerd en voldoende bevonden om te worden gebruikt op de testlocaties van de Nederlandse GGD bij mensen met milde tot matige symptomen van covid-19 zonder dat opnieuw testen nodig was met een reverse-transcriptase-polymerasekettingreactie
De weinige evaluaties van snelle antigeentests bij asymptomatische mensen in die tijd waren van kleine steekproefomvang, hielden grotendeels geen rekening met de vraag of de geteste persoon was blootgesteld aan een indexgeval en voerden geen viruskweek uit
De gevoeligheid van zowel de Veritor (Beckton Dickinson) als de Biosensor (Roche Diagnostics) voor het detecteren van SARS-CoV-2 in deze populatie was meer dan 60%, en nam toe tot meer dan 85% nadat een viral load cut-off was toegepast als een proxy van besmettelijkheid
De resultaten suggereren dat nauwe contacten van mensen met een bevestigde SARS-CoV-2-infectie nauwkeurig kunnen worden getest op SARS-CoV-2 met behulp van ofwel een snelle antigeentest vanaf dag 5, zelfs als ze (nog) geen symptomen hebben ontwikkeld
De tests mogen niet worden gebruikt als de gevolgen van gemiste infecties ernstig zijn
Niet nodig omdat het onderzoek buiten de reikwijdte van de Wet medisch-wetenschappelijk onderzoek met mensen valt (protocol nr. 20/750). Alle deelnemers ondertekenden een formulier voor geïnformeerde toestemming vóór elke studieprocedure.
Individuele deelnemersgegevens die tijdens het onderzoek zijn verzameld, zijn na de-identificatie beschikbaar voor alle deelnemers. Gegevens zullen beschikbaar zijn voor onderzoekers die een methodologisch verantwoord voorstel indienen om de doelstellingen in het goedgekeurde voorstel te bereiken. Voorstellen moeten worden gericht aan de corresponderende auteur om toegang te krijgen tot de gegevens. Gegevensaanvragers moeten een overeenkomst voor gegevenstoegang ondertekenen.
Wij bedanken de deelnemers, onderzoeksmedewerkers van de lokale GGD-testlocaties, medewerkers van de deelnemende laboratoria en onderzoeksmedewerkers van het Rijksinstituut voor Volksgezondheid en Milieu (RIVM) die hebben geholpen bij het verwerken van de vragenlijsten en het ontwerpen en verspreiden van de onderzoeksformulieren . Een speciaal woord van dank aan Esther Stiefelhagen, Roel Ensing en Wendy Mouthaan voor hun inzet in de logistiek naar en op de lokale testlocaties. Van alle drie werd schriftelijke toestemming verkregen om hun namen op te nemen. ES, RE en WH ontvingen geen vergoeding voor hun bijdragen.
Medewerkers: KGMM en JHHMvdW hebben het onderzoek geïnitieerd. ES, IKV, RPV, WvdB, EL, RM, GJS, KB, LH, JHHMvdW, SvdH en KGMM hebben het onderzoek ontworpen. IKV coördineerde het onderzoek. WvdB, SDP, RM, JV en RCH waren verantwoordelijk voor laboratoriumanalyses en gegevensverwerking. CHGvK voerde viruskweek uit. ES en IKV hebben de achterliggende data geverifieerd. ES voerde de statistische analyse uit in nauwe samenwerking met IKV en KGMM. ES, IKV, RPV, SvdH en KGMM hebben de eerste versie van het manuscript opgesteld. Alle auteurs hebben het manuscript kritisch gelezen en feedback gegeven. Alle auteurs keurden de indiening van de huidige versie van het manuscript goed. ES en IKV droegen evenveel als eerste auteurs bij. SvdH en KGMM droegen evenveel bij als senior auteurs. KGMM staat garant. De corresponderende auteur verklaart dat alle genoemde auteurs voldoen aan de auteurschapscriteria en dat er geen anderen zijn weggelaten die aan de criteria voldoen.
Concurrerende belangen: Alle auteurs hebben het ICMJE uniforme openbaarmakingsformulier ingevuld op www.icmje.org/coi_disclosure.pdf en verklaren: steun van het Nederlandse Ministerie van Volksgezondheid, Welzijn en Sport voor het ingezonden werk; geen financiële relaties met organisaties die mogelijk belang hebben bij het ingediende werk in de afgelopen drie jaar; geen andere relaties of activiteiten die het ingeleverde werk lijken te hebben beïnvloed.
Financiering: Dit onderzoek is gefinancierd door het Ministerie van Volksgezondheid, Welzijn en Sport. De financier had geen rol in de onderzoeksopzet; verzamelen, analyseren en interpreteren van gegevens; schrijven van het rapport; en besluit om het artikel voor publicatie in te dienen.
De corresponderende auteur (KGMM; de garant van het manuscript) bevestigt dat het manuscript een eerlijk, nauwkeurig en transparant verslag is van de studie die wordt gerapporteerd; dat er geen belangrijke aspecten van het onderzoek zijn weggelaten; en dat eventuele afwijkingen van het onderzoek zoals oorspronkelijk gepland (en, indien relevant, geregistreerd) zijn toegelicht.
Verspreiding naar deelnemers en gerelateerde patiënten- en publieke gemeenschappen: Het Nederlandse Outbreak Management Team dat het ministerie van Volksgezondheid, Welzijn en Sport adviseert over beleid met betrekking tot covid-19, adviseerde, op basis van de resultaten van dit onderzoek, dat nauwe contacten van mensen met een bevestigde SARS-CoV-2-infectie kunnen vanaf dag 5 worden getest op SARS-CoV-2 met een snelle antigeentest, ook als ze (nog) geen covid-19-symptomen hebben ontwikkeld. Als zodanig zijn de resultaten van ons onderzoek verspreid en momenteel verwerkt in een landelijk testbeleid. Destijds werd deze beleidswijziging door verschillende nieuwsuitzendingen behandeld.
Herkomst en peer review: niet in opdracht; extern peer-reviewed.
Dit is een Open Access-artikel dat wordt gedistribueerd in overeenstemming met de Creative Commons Attribution Non Commercial (CC BY-NC 4.0)-licentie, die anderen toestaat dit werk niet-commercieel te distribueren, te remixen, aan te passen, erop voort te bouwen en hun afgeleide werken op verschillende voorwaarden, op voorwaarde dat het originele werk correct wordt geciteerd en het gebruik niet-commercieel is. Zie: http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/.
Registreer voor waarschuwingen Als u zich heeft geregistreerd voor waarschuwingen, moet u uw geregistreerde e-mailadres gebruiken als uw gebruikersnaam
Als u citaten niet kunt importeren, neem dan rechtstreeks contact op met de technische ondersteuning voor uw product (links gaan naar externe sites):
Bedankt voor uw interesse in het verspreiden van het woord over The BMJ.
OPMERKING: we vragen alleen om uw e-mailadres zodat de persoon aan wie u de pagina aanbeveelt, weet dat u deze wilt zien en dat het geen ongewenste e-mail is. We leggen geen e-mailadres vast.
Deze vraag is bedoeld om te testen of u een menselijke bezoeker bent en om geautomatiseerde spam-inzendingen te voorkomen.